IVF embryoudvikling – indsigt i embryolaboratoriet

Infertilitet rejse i IVF laboratorium

Der er så meget pleje af dine æg, sæd og embryoner, der finder sted i IVF laboratoriet. Hver dag i processen har specifikke mål og opgaver, der udføres.

24 sekunders embryoudvikling i IVF laboratorium, der kan ændre folks liv…

Hvad er der i videoen? Med udviklingen af ny teknologi, herunder embryonovervågningssystemer, har embryologer nu et vindue til at se det voksende embryon uden at forstyrre det følsomme kulturmiljø. Den vedlagte video viser udviklingen af embryoet fra enkeltcellestadiet til det udvidede blastocyststadium. Fosteret kan ses klinge først til de to cellestadier, multiplicere til fire og 8 cellestadiet og derefter danne den senere fase morula. Efter morula fase, blastulation sker og embryoet udvikler sig til en fuldt udvidet blastocyst klar til overførsel eller kryopreservation. Forskere er stadig at analysere disse data til at afgøre, hvilke oplysninger fra timer af optagelser kan være klinisk signifikant, og at oplysningerne vil bidrage til at forudsige implantation potentiale af embryonerne. Husk på, at 24 sekunder i videoen betyder 5 dages embryonkultur og mange mennesker involveret i processen. Lad os se, hvordan det fungerer i en IVF Lab, og hvad er embryologens rolle i IVF behandlingsprocessen… Lad os starte fra begyndelsen.

---

Den infertilitet rejse kan ofte begynde med at lære et nyt sprog. ICSI, AZH, PGS IVF, IUI og andre forkortelser kan føles overvældende! Jeg ser mange par forsøge at få nogle kontrol over deres proces og navigere deres rejse med en kompliceret og undertiden idiopatisk diagnose. Ofte er der andre infertilitetsbehandlinger startet i den kliniske indstilling, før IVF endda anbefales. Som et par kæmper for at blive gravid, kan det føles som processen tager evigt; venter på aftaler, blod arbejde, og behandlingsplaner. Men når bogstaverne „IVF” er udtrykt fra en kliniker, behandlingen fremskynder herunder test, medicin administration og klinisk overvågning.

Mange patienter ved ikke, hvilken vigtig rolle embryologilaboratoriet spiller under behandlingen. Ikke alene er der ikke meget information om IVF Laboratory, men der tales ikke meget om selve området embryologi.

Embryologisk laboratorium og kvalitet

Et embryologisk laboratorium ledes typisk af en person med strenge kvalifikationer, herunder en PhD eller MD. Laboratoriedirektøren arbejder meget tæt sammen med klinikere og læger for at give dig kvalitetspleje ved hjælp af embryologer og laboratorieeksperter. Hver stat regulerer licenskravene for laboratoriefagfolk, og disse kvalifikationer gennemgås af akkrediteringsorganer. Et embryologisk laboratorium er designet til at give en specialiseret cellekultur miljø. Hele laboratoriet er designet til at efterligne æggelederen og livmoderen. De luftkvalitets-, miljø-, materiale- og sikkerhedsprotokoller, der anvendes, er meget specialiserede. Luftkvalitet er en meget vigtig komponent i et vellykket IVF / embryologi laboratorium. Mange laboratorier har et udpeget ventilationssystem med HEPA-filtre og kulstoffiltre for at sikre, at kun den reneste luft er i laboratoriet. Byforurening, rengøringsmidler, laminat bordplader og tæppe shampoo er alle eksempler på potentielt giftige kilder, der hæmmer embryoudvikling. I mit laboratorium bruger vi et udpeget ventilationssystem til laboratoriet og omkring ægudtagnings- og embryonoverføringssuiter. Det har 4 separate filtersystemer og det maksimale antal frisk luft udvekslinger. Vores ejer og kliniker selv valgt vores placering baseret på vindmønstre, der sikrede mindre forurenet luft fra det nordlige Minnesota i stedet for luft fra de mere stærkt handlede, højt befolkede inner- byområder. Du er måske interesseret i

• Sådan Forbered dig på IVF Embryo Transfer, før og efter
• Hvad skal man gøre og hvad ikke at gøre efter Embryo Transfer?
• IVF med donoræg succesrater – Sandheden klinikker ikke fortælle dig

Miljøet i et IVF-laboratorium

Miljøet i IVF / embryologi laboratoriet er også nøje kontrolleret. Forskning har vist, at embryoner kan være følsomme over for lys, da intet lys når dem, som de vokser inde i kroppen, derfor laboratoriet sandsynligvis har lidt eller intet naturligt lys, er varm og meget fugtig. embryonerne skal transporteres rundt i laboratoriet under forskellige procedurer, så vi holder temperaturen varm for at forhindre hurtig afkøling af de retter, de medbringes i, og holde alt udstyr og arbejdsflader på 37 C. Vi kontrollerer også fugtigheden, hvis det er muligt, for at forhindre fordampning af vores medier, hvilket ville forårsage en ændring i osmolariteten og påvirke embryonerne adgang til forskellige proteiner og sukker, der er nødvendige for at vokse. Embryologer bruger ofte skure, hårovertræk, handsker og masker for at beskytte os mod biologiske midler og for at forhindre forurening af kultursystemerne. Der er en meget fin balance mellem aseptisk kultur og plejende kultur. Over at bruge rengøringsmidler i forsøget på at være så aseptisk som muligt kan skabe giftig luft og den forkerte type handsker kan være skadelig. Byggematerialer i design og bygning af laboratoriet kan påvirke cellevækst samt, og off gasning af laminat, gulve og skabe kan påvirke luftkvaliteten. Et laboratorium, der tester og overvejer alle mulige kilder til luftforurening vil have større succes.

Embryokultur

Embryo kultur og gamete forarbejdning kræver brug af forbrugsvarer såsom indsamling beholdere, dyrkningsretter og centrifugerør, der normalt fremstilles ved hjælp af plast. Mange laboratorier bruger en bioassay til at teste disse materialer og til at kontrollere, at de ikke har nogen effekt på cellekultur. Labs har også mulighed for at købe materialer, der er blevet forudtestet og bevist sikker. Hvert parti (eller felt) skal kontrolleres for at sikre, at der ikke påvises nogen variation i produktfremstillingen. På denne måde kan vi stole på, at enhver variation i celleadfærd skyldes selve cellen, ikke på grund af den beholder, den lever i. For eksempel er vi meget specielle med hensyn til disse sædopsamlingsbeholdere. Det er derfor, vi leverer indsamling kits og hjemmet Tupperware, filmkasse eller recept flaske er ikke brugbare. Hvis din prøve er bestemt til at være under de normale parametre, vi ønsker at sikre, at beholderen, det blev indsamlet i ikke påvirke testresultaterne. De medier, vi bruger til at dyrke og pleje dine gametes er også strengt reguleret. Det er ofte formuleret fra syntetiske menneskelige fallopian tubal væske. Substraterne i medierne giver energi til oocytter, sæd og embryoner, så de kan vokse og udvikle. De fleste typer medier har brug for opvarmning og ligevægt før brug. Vi forbereder dine retter og rør dagen før for at sikre, at det er optimeret til celletypen. Det miljø, cellerne dyrkes i, er anderledes end rumluft og temperatur. Det betyder, at vi er nødt til nøje at kontrollere kulturforholdene for at sikre, at det er så tæt på, hvordan den gennemsnitlige livmoder / æggeleder er. CO2, O2 og temperatur måles hver dag for at sikre, at systemerne er sikre og optimale. Vi bruger en betydelig mængde tid dedikeret til kvalitetskontrol og dokumentation hver dag. Efter embryologerne sørger for at miljøet og materialerne er sikre, begynder arbejdet. Vi begynder tidligt om morgenen, udfører kvalitetskontrol foranstaltninger og begynder at forberede sig til dagen. Når du ser på en kliniks hjemmeside, du ønsker at sikre, at laboratoriet er akkrediteret, og at klinikken har passende personale. Gradkrav og personaleforhold er anført i „Reviderede minimumsstandarder for praksis, der tilbyder assisteret reproduktionsteknologi”¹ af CDC.

IVF-laboratorieforberedelse

Vi forbereder os på dine gametes i laboratoriet. Vi modtager information og ordrer fra din læge om de forskellige typer af laboratoriebehandling dine gametes vil modtage. Vi er nødt til at vide, om du bruger dine egne æg eller sæd (eller ved hjælp af donoræg eller sæd), koordinere hvor og hvornår prøverne vil være til rådighed, og hvad befrugtning, kultur, overførsel, biopsi og frysning muligheder klinikeren har bestilt til dig. Dagen før din hentningsprocedure begynder vi med at forberede og fylde dine retter og rør. Dag 0 eller hentningsdag er den dag, vores arbejde med oocytterne begynder!

Embryo udvikling i IVF lab – 5 dage, der kan ændre folks liv

Ægudtagningsdag – dag 0

Vi er involveret i din æghentning ved at lede efter og identificere æg fra aspirant follikelvæske. Efter ægudtagningsproceduren hviler æggene. Afhængigt af hvilken metode din læge vælger til befrugtning, vil æggene blive behandlet for at fjerne deres cumulus celler til ICSI eller vasket og placeret i dråber til konventionel insemination. Hvis ICSI er valgt, og cumulus celler fjernes, og æggene vil begynde en proces, hvor en lille nål bruges til at samle op og injicere den bedste morfologisk formet, motil sperm i cytoplasma af dine æg. Morfologi er det udtryk, der anvendes til at vurdere eller beskrive formen af sædhovedet. Jo mere normal / oval sædhovedet er, jo højere er risikoen for, at det nukleare materiale inde i sædhovedet også er normalt.

Jeg elsker altid en „det handler om udseendet” joke her, når jeg taler med patienter.

Sperm motilitet bruges til at vurdere levedygtighed og er en indikator for, at sædceller er i live og i stand til at gøde et æg. Hvis en patient ikke har nogen motil sperm, levedygtighed kan stadig være identificerbar, men din prognose er reduceret. Den typiske normale befrugtning rate eller succes med ICSI er 75%. En vigtig påmindelse for patienter…… ikke alle æg er lige. Under denne ICSI-proces evalueres og noteres ægmorfologien også. Mens vi ikke kan se det nukleare eller DNA materiale af ægget, andre morfologiske faktorer som granularitet og refraktile organer kan noteres i nogle eller alle æg og kommunikeres til klinikerne. Embryologer kan have indsigt baseret på disse første evalueringer af dine gametes, der kan hjælpe klinikeren ændre en behandlingsplan. Mens vi har lært en masse om æg og sædkvalitet og udvikling, er der stadig meget, vi endnu ikke ved. Den måde, at æg og sperm udseende kan være en indikator for sin kvalitet, eller potentiale for succes, men der er gametes på begge sider af morfologi spektrum, der kan skabe smukke babyer. Vi forsøger at befrugte alt med de bedste gametes vi har og gå derfra.

Noget jeg har delt mange gange i årenes løb, der har syntes at forbinde med patienter er købmandsanalogien. Når en person går til købmanden og åbner en karton med æg, de ser meget ens og godt. Det er ikke tilfældet i et dusin mennesker.

Selv i optimale donoræg tilfælde, ser jeg variabilitet. Dette giver mening, hvis du tænker på, at alle de follikler, som æggene blev aspireret fik den samme dosis medicin i dit blodbanen. Selv folliklerne reagerede anderledes end denne medicin. Nogle målte 13mm og omkring 21mm. Grunden til, at nogle follikler, æg osv. reagerede korrekt og uhensigtsmæssigt, kan give os en vis indsigt i, at nogle æg aldrig skulle have ægløsning eller en graviditet. Embryologi er stadig ikke reparative, kun nærende af, hvad du allerede har. 20 æg vil sandsynligvis ikke oversætte til 20 embryoner, blastocyster eller spædbørn, selv med en frugtbar ægdonor. Hvert laboratorium har et defineret optimalt vindue til denne evaluering, og det sker normalt morgenen efter din hentning. Embryologen ser på embryonerne med et højt drevet mikroskop for at se, om normal befrugtning fandt sted. Dette kan bestemmes ved at sikre, at vi ser 2 pronuclei i dine embryoner. En pronuclei er moderens bidrag til fosteret og den anden pronuclei er den faderlige komponent (den anden kopi bortvises fra cytoplasma i form af en polar krop). Embryoner, der udviser unormal befrugtning er kasseret og normalt kun de embryoner, der udviser normal befrugtning er placeret i kultur retter med friske medier, der har alt, hvad de behøver for at vokse og placeret tilbage i inkubatorer for resten af dagen og natten efter evalueringen.

Unormal befrugtning:

Embryo vækstevalueringer – dag 2 til dag 4

Hvert laboratorium har deres egne systemer baseret på de medier og udstyr, der anvendes, der bestemmer, hvor ofte og hvornår evalueringer foretages. Nogle laboratorier ændre medier hver 48 timer og evaluere dagligt, mens nogle laboratorier kultur gennem uden evalueringer indtil dag 5. Andre faktorer, der kan påvirke antallet og når evalueringer udføres, er antallet af embryoner, dato for overførsel af embryoner, og om din klinik udfører friske eller frosne overførsler. Vækstevalueringer kan give to funktioner. De kan bruges til at ændre medier (og næringsstoffer) og til at evaluere de indledende faser af udviklingen i laboratoriet. Embryos på dag 2 spænder ideelt fra 2 til 4 celler og har en lav grad af fragmentering, afbalanceret cellesymmetri og en overordnet kvalitetsbetegnelse. Fragmentering er blegning af ekstracellulært materiale fra blastometre, de celler, der makeup embryo på dette stadium.

Ingen er 100% sikker på, hvad der forårsager et embryon til fragment, men det er en prognostisk indikator. Det betyder, at embryoner med en høj grad af fragmentering har en reduceret chance for implantation.²

Det betyder ikke, hvis et embryo er fragmenteret det vil ikke implantere og resultere i en sund graviditet og foster eller at hvis du overfører et embryon med en lav grad af fragmentering, at det altid vil resultere i succes. Funktionen af fragmenteringsevalueringen er til information om behandlingscyklussen, laboratoriekvalitetskontrol og hvordan patientens celler reagerer på laboratoriemiljøet. Embryologer vurderer også cellesymmetri under deres vækstvurdering. Symmetri er en indikator, som hver celle gruppe deler. For eksempel, hvis du har en tre-celle asymmetrisk embryo, måske en af de to celler kløvet, men den anden ikke og vises som en stor celle. Et asymmetrisk embryo har også en reduceret prognose. Den samlede embryonkvalitet af et embryon er blevet standardiseret af Society of Assisted Reproductive Technology (SART.org).^[3,4,5]

Embryonfragmentering:

Embryoklassificering:

Et typisk udseende af embryoner i mikroskopet ser sådan her ud:

Som du kan se ovenfor – der er mange forskellige embryoner i forskellige stadier med forskellige grader af fragmentering, symmetri og kvalitet. Embryologer bruge disse parametre til at vælge embryonerne med den bedste prognose for graviditet. Du kan også være interesseret i at læse: Den gode, Den dårlige og Baby Maker – Embryo kvalitet – Grading Systems

Forberedelse til embryonoverførsel – dag 5 (men gælder også for dag 2 eller dag 3 overførsler)

På dagen for din planlagte embryonoverførsel vil embryologen evaluere alle dine embryoner. De vurderer alle dine embryoner individuelt for attributter, der har vist sig at være forbundet med højere implantationspotentiale. Disse attributter er forskellige for forskellige udviklingsstadier.

Vi vælger det bedste, du har. Alle folks embryoner er forskellige.

Hvis du har flere embryoner, end din læge har godkendt til at overføre, der har disse positive egenskaber, kan vi anbefale, at du kryopreserve eventuelle overskydende embryoner. Forventninger kan være meget udfordrende i denne tid… En fuldt udvidet eller udklækket blastocyst med en tæt pakket indre cellemasse og organiseret trofectoderm er en ønsket embryo til overførsel. Men om en blastocyst er i de tidlige stadier eller udklækning kan også afhænge af tidspunktet for hentning og overførsel. Så embryologen vil vælge det bedste embryo til rådighed til overførsel og ængsteligt afvente din graviditetstest også! At have ekstra embryoner at fryse eller høj kvalitet embryoner at overføre garanterer ikke succes og omvendt ikke har nogen embryoner at fryse eller dårlig kvalitet embryoner betyder ikke fiasko, så det er vigtigt at forsøge at holde et åbent sind og vente til dine endelige testresultater for næste trin og planer for fremtiden. Hvert gamete / embryo er i en anden fase af pleje på en given dag. Nogle patienter får æg og sæd hentet, og nogle patienter får overført embryoner, og der er kulturstadier overalt imellem. Planlægning, kommunikation og systemer til at lette forberedelsen og behandlingen af de forskellige patienter er afgørende.

Det meste af, hvad embryologer gør, afhænger af tidsplaner og timing. Mange protokoller har optimale intervaller, og vi kan ikke tage hjem, når tiden går. Vi tager hjem, når arbejdet er færdigt, og alt er klar til næste dag.

Fordi hvad vi gør kræver forberedelse, en uplanlagt ændring kan være forstyrrende for strømmen. Det er nyttigt for dig at være til tiden for din aftale, følge instruktioner og være forberedt. Prøv at være tålmodig, mens du venter på telefonopdateringer og embryologi information. Vi tager os af dine embryoner, behandler dine gametes og dem vil ikke vente på telefonopkald eller acceptere undskyldninger. Vi ved, du er ængstelig venter på at høre opdateringer og høre om dine fremskridt. En god embryolog har fremragende tekniske færdigheder og er en meget organiseret og detaljeret orienteret person. Dette område kræver omfattende dokumentation og protokoludvikling. En person, der har fremragende hånd øje koordination og en evne til papirarbejde er en stor pasform. At være morgenmenneske er også gavnligt, da meget af vores arbejde er færdigt, før solen står op. Vi skal være organiseret og arbejde godt under pres.

Embryoklassificering:

Den embryolog stemme om den rolle, IVF laboratorium i behandlingsprocessen, af Ashley Wong

Jeg håber at give dig en introduktion til det infertilitetssprog og til embryologi giver dig komfort under en meget stressende rejse. De professionelle i embryologi laboratoriet er ofte hårdt på arbejde for at sikre, at alt er optimalt før, under og efter din cyklus til at hjælpe dig med at opbygge din familie. Vi hjælper klinikere ved at give dem benchmarkinformation, vurderinger og oplysninger, som de overvejer, når de laver behandlingsplaner og protokoller. Vi er dedikerede individer, der nyder „babysitting” små celler og er påvirket af dine historier og rejser!

Personligt er dette job ikke let. Vi tilbringer lange timer i et lille og ofte mørkt rum uden mad eller drikke i timevis. Vi bliver, til arbejdet er gjort. Vores timer afhænger af, hvornår patienterne bliver skudt, og vores privatliv afhænger af vores professionelle skema. Vi mødes ofte ikke engang eller taler med patienterne ud over identitetskontrol og embryonopdateringer.

Jeg valgte dette område, fordi jeg er motiveret til at bygge familier og give patienter den kærlighed og glæde min familie bringer mig! Familier vokser på mange forskellige måder, så den infertilitet rejse en patient går kan være meget anderledes! Hver patient kommer til os med forskellige medicinske, etiske, religiøse og personlige faktorer, som de ønsker taget i betragtning. Vi gør vores bedste for at ære hvem de er som person, par (hvis relevant) og patient. Jeg er meget stolt over at se efter deres dyrebare små embryoner og tage ansvaret meget alvorligt.

Jeg ser også mig selv som deres „første babysitter” på mange måder. For eksempel, vi spiller musik i laboratoriet og ofte tale med gametes som de kan høre os.

Patienter, der bærer specielle sokker, medbringer cookies / godter og kedelige „at være” fædre altid har en indvirkning på mig. Jeg leder efter fødselsvarsler og feriekort fra patienterne og føler en følelse af stor stolthed over at se deres familier vokse. Jeg elsker at møde nogle af mine børns holdkammerater og venner, som jeg ved, jeg hjalp med at vokse og se dem deres første par dage på denne planet.

Jeg har set mirakler, der har styrket min tro og tab, der har udfordret den. Jeg har fejret med tusinder og grædt med nogle også.

Jeg har deltaget i tusindvis af patienters pleje, men nogle få særtilfælde vil altid skille sig ud og har rørt mit hjerte. En sag, der virkelig havde indflydelse på mig, var en person, der brugte mange timer, i mange år, på at deltage i mine børns liv og bruge meget af sig selv på deres udvikling og talent. Denne person havde en søskende, der blev påvirket af infertilitet og de søgte ud vores klinik for behandling. Jeg var så følelsesladet over deres pleje. Jeg bliver træt af at skrive om det i dag. Jeg ønskede at give det par og deres familie samme engagement, intensitet af dygtighed og hengivenhed til deres sag, at deres søskende havde givet min familie. Jeg ønskede så meget at give dem den glæde og kærlighed, som jeg modtager fra at se mine børn udvikle sig! Ved deres embryonoverførsel afslørede jeg, at jeg kendte deres søskende og efter jeg forlod rummet blev så følelsesladet, at jeg havde brug for et minut til at indsamle min komplosion, før jeg udførte den tekniske procedure for at forberede deres små embryoner til overførsel. De havde succes med deres behandling, og jeg føler mig så glad for at have været en del af det og for at have tilbagebetalt den ånd og energi, der blev givet til mig og min familie! En anden patient historie, der havde en anden indvirkning på mig skete på et nabolag for mange år siden, hvor værten trak mig til side i et privat værelse. Jeg vidste, at hun var forælder til et adopteret barn, fordi hendes barn var i samme alder som et af mine børn, og jeg så hende ofte i skolen. I det private rum trak hun det embryobillede, hun fik ved overførslen. Jeg huskede straks, at hun ikke havde haft succes og var bekymret over, hvor samtalen kunne gå hen. Hun gav hurtigt udtryk for taknemmelighed og takkede mig for min rolle i hendes rejse og for billedet. Da jeg udtrykte forvirring om taknemmelighed for billedet, forklarede hun, at billedet gav hende noget konkret at sørge over. Hun sagde, hun skulle sørge over tanken om at bære en graviditet og et biologisk barn. Efter hun havde givet slip på den vej i sin rejse, kunne hun forfølge en ny vej, der omfattede international adoption. Denne nye vej til sidst førte til, at hun blev mor og havde en familie. Den kvinde har hjulpet mig med at få vejret mange fiaskoer med håbet om, at hvis intet andet, gav vi dem lukning, at de forsøgte alt, hvad de kunne, før de gik videre til en anden vej eller rejse. Som du kan se, spiller embryolaboratorieholdet en vigtig rolle i din behandlingsproces. Vi arbejder hårdt bag kulisserne for at sikre, at folk, miljø, udstyr og forsyninger er optimerede til din succes. Du kan ikke altid se os, men vi er der altid holde dine embryoner, historier, håb og drømme i vores tanker døgnet rundt! Billedet „embryo Koala”

Ressourcer:

1. Reviderede minimumsstandarder for praksis med assisteret reproduktionsteknologi Fertilitet og sterilitet Vol. 90, Suppl. 3, November 2008 https://www.fertstert.org/article/S0015-0282(08)03722-9/pdf
2. human embryofragmentering in vitro og dets konsekvenser for graviditet og implantation Fertilitet og sterilitet Vol. 71, No. 5, maj 1999, https://www.fertstert.org/article/S0015-0282(99)00092-8/pdf
3. Standardisering af klassificering af embryomorfologi Fertilitet og sterilitet Vol. 94, No. 3, August 2010, https://www.fertstert.org/article/S0015-0282(10)00856-3/pdf
4. Det forenklede SART-embryoscoringssystem er stærkt korreleret til implantation og levende fødsel i enkeltblastocyst overførsler, J Assist Reprod Genet. 2013 Apr; 30 (4): 563-7, https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3644132/
5. En gennemgang af Society for Assisted Reproductive Technology Embryo Grading System og foreslået ændring, Int J Fertil Steril. 2016 Jul- Sep; 10 (2): 141-7 https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC4948064/